通過可逆終止子化學進行測序

這是一種可循環使用的可逆終止子結合的dNTPs，包括核苷酸摻入，熒光成像和裂解。熒光標記的終止子在每個dNTP加入時成像，然後裂解以整合下一個鹼基。在化學上受阻，因此每次摻入都是唯一的事件。每個鹼基摻入步驟之後都有一個成像步驟，然後通過化學方法除去被保護的基團，以製備用於 DNA 的下一個摻入的每條鏈 DNA 聚合酶。由用戶定義的儀器設置確定，此步驟的連續順序將持續特定數量的循環。 3'封閉基團最初被認為是酶促逆轉或化學逆轉。化學操作一直是Solexa和Illumina機器的基礎。通過可逆終止劑化學進行的測序可以是Illumina / Solexa使用的四色循環，或者Helicos BioSciences使用"虛擬終止劑"，該終止劑具有作為抑製劑的第二個核苷類似物，因此是一種無色終止劑。這些終止子具有用於終止或抑制基團的適當修飾，以使 DNA 合成在單個鹼基添加後終止。

圖像155A | PacBio SMRT技術和牛津納米孔可以使用未改變的 DNA 來進行甲基化。| Nivretta Thatra / CC BY-SA（https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/legalcode）| Page URL ：來自Wikimedia Commons的（https://commons.wikimedia.org/wiki/File:3rd_gen_Epigenetics.png）

作者 : Yavor Mendel

參考文獻：

分子生物學技術I

分子生物學工具III