單克隆抗體生產的許多工作源於雜交瘤的生產，這涉及鑑定產生特異性針對目的抗原的抗體的抗原特異性漿細胞/成漿細胞（ASPC），並將這些細胞與 myeloma 細胞融合。兔B細胞可用於形成兔雜交瘤。聚乙二醇用於融合相鄰的質膜，但是成功率很低，因此只能使用只能在融合細胞中生長的選擇性培養基。這可能是由於 myeloma 細胞失去了合成次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖基轉移酶（ HGPRT ）的能力，次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖基轉移酶是挽救核酸合成所必需的酶。沒有 HGPRT 這些細胞不是問題，除非另外破壞了 novo 嘌呤合成途徑。使細胞暴露於氨基蝶呤（一種抑制二氫葉酸還原酶DHFR的葉酸類似物），使其無法使用de novo 途徑，對核酸完全營養缺陷，因此需要補充才能存活。
選擇性作物培養基被稱為HAT培養基，因為它包含次黃嘌呤，氨基蝶呤和胸苷。該培養基對融合細胞（雜交瘤）具有選擇性。未融合的 myeloma 細胞由於缺乏 HGPRT 而無法生長，因此無法複製其 DNA 。由於其有限的壽命，未融合的脾細胞不能無限期地生長。由於被稱為脾細胞伴侶供應的 HGPRT 和 myeloma 伴侶具有使其永生的特性（類似於癌細胞），只有融合雜交細胞（稱為雜交瘤）才能在培養基中無限期生長。
然後將這種細胞混合物稀釋，並在微量滴定孔上從單親本細胞中培養出克隆。然後測定由不同克隆分泌的抗體結合抗原的熟練程度（用 ELISA 或抗原微陣列測定法測試）或免疫斑點印跡。然後選擇生產力最高，最穩定的克隆以備將來使用。
圖片460A | 用於生產單克隆抗體的操作的一般表示。| Adenosine / Attribution-Share Alike 3.0 Unported | Page URL ：來自Wikimedia Commons的（https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Monoclonals.png）
مؤلف : Russom Kilsen
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