用於FRET的熒光團

一種常見的生物學對熒光團是青色熒光蛋白( CFP )–黃色熒光蛋白( YFP )對。兩者都是綠色熒光蛋白( GFP )的顏色變體。用有機熒光染料標記需要純化,化學修飾和細胞內註射宿主蛋白。 GFP 變體可以通過基因工程連接到宿主蛋白上,這會更加方便。類似地,可以將通過蛋白酶切割串聯連接的 CFP 和 YFP (串聯二聚體)的融合體用作切割測定。

BRET

用熒光團供體進行的 FRET 的限制是外部照明啟動熒光轉移的要求,這可能導致受體直接激發或 photobleaching 激發的結果產生背景噪聲。為了避免該缺點,已經開發了生物發光共振能量轉移(或BRET)。該技術使用生物發光的熒光素酶(通常是來自腎性腎病的熒光素酶)代替 CFP 來產生與 YFP 兼容的初始光子發射。

圖片080A | 福斯特共振能量轉移( FRET )概念的卡通圖。| Curtis Neveu(https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Concept_of_FRET.png),

圖片080A | 福斯特共振能量轉移( FRET )概念的卡通圖。| Curtis Neveu(https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Concept_of_FRET.png),"FRET概念",https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/legalcode(來自Wikimedia Commons)

作者 : Yavor Mendel

參考文獻:

分子生物學技術I

分子生物學工具III

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